實(shí)驗目的(dí)：對(duì)全(quán)基(jī)因(yīn)組DNA樣(yàng)品進(jìn)行(háng)100-500bp區間的片(piàn)段(duàn)化(huà)處理
實驗(yàn)設備：非接觸(chù)DNA打(dǎ)斷儀XM-M220(單(dān)槽(cáo))
基因組DNA樣品(pǐn)超聲(shēng)打斷(duàn)的(dí)實(shí)驗步驟：
1.提前(qián)15分鐘(zhōng)將(jiāng)三(sān)款(kuǎn)儀(yí)器(qì)的冷(lěng)水(shuǐ)機啟(qǐ)動(dòng)，設(shè)置(zhì)溫(wēn)度為(wéi)4℃。
2.將(jiāng)每個0.2mL EP管(guǎn)加(jiā)入(rù)130μL濃度(dù)為12ng/μL的(dí)全(quán)基(jī)因組(zǔ)DNA溶(róng)液。
3.將(jiāng)2管(guǎn)裝(zhuāng)好樣品(pǐn)的(dí)0.2mL EP管分別(bié)放入(rù)儀器(qì)的(dí)適(shì)配器(qì)當中(zhōng)，其(qí)他空餘的(dí)孔(kǒng)位由(yóu)加同樣(yàng)體積(jī)水的0.2mL EP管(guǎn)補齊。
4.程(chéng)序設置：溫度(dù)4℃，超(chāo)聲工(gōng)作時間(jiān)20s 間隔(gé)時(shí)間(jiān)10s，總時長(cháng)分(fēn)別為3分(fēn)鐘和(hé)4分鐘(zhōng)。
5.程序結(jié)束(shù)後，取出樣品使用毛細(xì)管(guǎn)電泳進(jìn)行(háng)基因組片段(duàn)化檢測(cè)。
打斷完的(dí)毛(máo)細(xì)管(guǎn)電泳檢測結果圖：
1.程序(xù)設置：溫(wēn)度4℃，超(chāo)聲工作(zuò)時(shí)間20s 間隔10s，總(zǒng)時長4分鐘
2.平(píng)均(jūn)片(piàn)段大小(xiǎo)：266 bp，99-503 bp區間占比 89.33%。
實(shí)驗(yàn)注意(yì)事項(xiàng)：
1.提前15分(fēn)鐘(zhōng)將三款儀(yí)器(qì)的冷水(shuǐ)機啟動，設置(zhì)溫度(dù)為(wéi)4℃
2.試用TPX材質的EP管，管子的材質影(yǐng)響超(chāo)聲打(dǎ)斷效果(guǒ)。
3.客戶(hù)在(zài)做實驗時一定(dìng)要(yào)讓跟隨著老(lǎo)師一起(qǐ)做(zuò)實驗(yàn)，不然(rán)後續(xù)結果(guǒ)不理想無法(fǎ)分(fēn)析(xī)出原因。
非接觸超聲波DNA打斷儀(yí)采用(yòng)等溫(wēn)，旋(xuán)轉(zhuǎn)離(lí)心管及(jí)非接觸(chù)的(dí)方(fāng)式對樣品進行打(dǎ)斷(duàn)匀(yún)漿和(hé)混合。通(tōng)過球(qiú)麵固(gù)態(tài)超聲(shēng)換(huàn)能器將聲波(bō)以三(sān)維(wéi)方(fāng)式聚焦(jiāo)到(dào)樣本區域，聚焦聲波能(néng)夠(gòu)以不同角(jiǎo)度(dù)的能(néng)量(liáng)輸(shū)入(rù)獲得(dé)良好(hǎo)的(dí)處(chǔ)理效果(guǒ)。