實驗目的:此次(cì)實驗是以腫(zhǒng)瘤(liú)細胞為樣本,選用一體式(shì)超聲波(bō)細(xì)胞破(pò)碎儀對細胞樣品進行超(chāo)聲破碎(suì),以(yǐ)便後(hòu)續對細(xì)胞樣品的蛋白提取。

實(shí)驗步(bù)驟(zhòu):
1,儀器準(zhǔn)備:一體式超(chāo)聲波細胞破(pò)碎儀(yí)XM-650T
2,樣(yàng)品準(zhǔn)備(bèi):培養的腫(zhǒng)瘤(liú)細胞(bāo),從培養皿(mǐn)中(zhōng)刮(guā)下來放在1.5ml管中(zhōng),加(jiā)入(rù)100μl裂解(jiě)液,置於(yú)冰上孵育30min。
3,儀器操作:打開(kāi)儀(yí)器,使(shǐ)用(yòng)2mm探(tàn)頭,設(shè)置參(cān)數:功(gōng)率為10%,工作3s,間歇5s,間歇模(mó)式,總時間30s。
4,實驗結(jié)束(shù):置於4℃離(lí)心(xīn)機13000rpm離心20min,觀察樣品管內(nèi)樣品破(pò)碎效(xiào)果(guǒ),
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
5,觀察(chá)到(dào)樣品(pǐn)已(yǐ)完(wán)全破碎,離(lí)心後的(dí)樣(yàng)品呈(chéng)澄清上(shàng)清無(wú)雜(zá)質,沉(chén)澱物為細胞碎片(piàn)。


實驗注(zhù)意事項(xiàng):
1.為(wéi)保障(zhàng)蛋(dàn)白樣品(pǐn)活性,操作全程(chéng)在(zài)冰上進(jìn)行
2.因樣(yàng)品量較(jiào)少(shǎo),超聲功(gōng)率(shuài)盡(jìn)量(liáng)調小,時間設為間(jiān)隔模(mó)式
3.每(měi)個樣(yàng)品(pǐn)不同,超聲(shēng)完成一個樣品後(hòu),用純水(shuǐ)清洗後進行下(xià)一個