在二代測序(xù),染色質(zhì)免(miǎn)疫(yì)共沉澱(diàn)等分子生物(wù)學(xué)實驗中(zhōng),非接觸超(chāo)聲(shēng)波DNA打(dǎ)斷(duàn)儀憑(píng)借其(qí)單(dān)通道高效設計,精準空化(huà)效應(yīng)及低溫(wēn)穩(wěn)定(dìng)控製(zhì),成為了實驗室DNA片段化的高效(xiào)解決方(fāng)案(àn)。

在基因(yīn)組(zǔ)學研究中(zhōng),DNA片段化的目(mù)標通常是獲得200-800bp的(dí)均匀片(piàn)段,以滿(mǎn)足(zú)測序(xù)或(huò)免疫沉(chén)澱的需求。然而,傳(chuán)統方法(fǎ)麵臨諸多挑(tiāo)戰(zhàn),機械剪切易造(zào)成(chéng)交(jiāo)叉汙染且(qiě)批次(cì)間重(zhòng)復性差;酶(méi)切存在序列偏(piān)好(hǎo)性,可能(néng)導致某些區域過(guò)度(dù)或不(bù)足剪切(qiē);熱(rè)效應問(wèn)題,長時間(jiān)超(chāo)聲可能導致DNA變性(xìng),影(yǐng)響(xiǎng)後(hòu)續實驗。
超聲波DNA打斷(duàn)儀(yí)通(tōng)過非(fēi)接觸式(shì)的(dí)超聲波(bō)破碎(suì)技術(shù),結合低(dī)溫(wēn)水浴穩定(dìng)係(xì)統,有效(xiào)解決(jué)了(liǎo)上(shàng)述實驗(yàn)問(wèn)題(tí),確(què)保(bǎo)DNA片段化過程高效(xiào),精(jīng)準,可重(zhòng)復。
非接(jiē)觸超聲(shēng)波(bō)打(dǎ)斷儀(yí)的(dí)核心技(jì)術優勢:
1.空化(huà)效應(yīng)與(yǔ)流(liú)體(tǐ)剪(jiǎn)切力(lì)協同(tóng)作用(yòng):超(chāo)聲(shēng)波打斷儀的核(hé)心工作(zuò)原理是(shì)利(lì)用(yòng)高頻超聲(shēng)波(bō)在液體中(zhōng)產生的(dí)空穴效應;這(zhè)些效(xiào)應在(zài)迅(xùn)速膨(péng)脹並(bìng)崩塌(tā)的(dí)同時(shí)會(huì)釋放強(qiáng)烈的(dí)瞬(shùn)時剪切(qiē)力(lì),可使(shǐ)DNA分子鏈斷裂(liè)。相(xiāng)較於(yú)傳統(tǒng)探頭超聲,該技術能量(liáng)分(fēn)布(bù)的更均(jūn)匀,避免了局部(bù)過熱(rè)導(dǎo)致的DNA損(sǔn)傷。
2.單(dān)通(tōng)道高通量設計(jì),避免(miǎn)交(jiāo)叉汙染:雖然該實驗設(shè)備(bèi)是單通道設備,但(dàn)其適配器支持多個(gè)樣(yàng)本(běn)的(dí)同步(bù)處理,所(suǒ)有(yǒu)樣本(běn)均(jūn)在(zài)獨立封(fēng)閉(bì)EP管(guǎn)中(zhōng)進行破(pò)碎,杜絕樣品間(jiān)的交(jiāo)叉汙染。
3.4℃低溫(wēn)水(shuǐ)浴+旋轉適配(pèi)器(qì),保(bǎo)障樣本(běn)完整性:實(shí)驗設(shè)備在(zài)低(dī)溫(wēn)環境中(zhōng)進(jìn)行,避(bì)免了樣品(pǐn)的變(biàn)性;自(zì)動旋(xuán)轉適配器的應用確保了超聲能(néng)量均匀(yún)分(fēn)布,避(bì)免樣(yàng)本(běn)聚集導(dǎo)致(zhì)的剪切不(bù)均(jūn)。
典(diǎn)型應(yīng)用(yòng)案(àn)例:
某(mǒu)研(yán)究(jiū)團隊使(shǐ)用(yòng)非接(jiē)觸超(chāo)聲波(bō)打斷儀(yí)對(duì)結腸癌細胞染(rǎn)色(sè)質(zhì)進(jìn)行DNA打(dǎ)斷,以進行後續ChIP-seq分析。實驗采用(yòng)4組(zǔ)梯(tī)度參數進行優(yōu)化,成功(gōng)獲(huò)得200-800bp的目(mù)標片(piàn)段,且電(diàn)泳檢測顯示條(tiáo)帶分(fēn)布高(gāo)度均(jūn)一。
綜(zōng)上,非接(jiē)觸(chù)超聲波(bō)DNA打(dǎ)斷儀通過空(kōng)化效應(yīng),低(dī)溫穩(wěn)定控(kòng)製(zhì)及高(gāo)通量設計,為分子生物(wù)學研究(jiū)提供(gōng)了高效(xiào),可靠的(dí)DNA片(piàn)段(duàn)化方(fāng)案(àn)。無論(lùn)是(shì)ChIP-seq,NGS建(jiàn)庫,還是(shì)蛋(dàn)白質-DNA相互作用研(yán)究(jiū),該(gāi)設備(bèi)均(jūn)能(néng)確(què)保(bǎo)實(shí)驗數據(jù)的準(zhǔn)確(què)性(xìng)與可重復性,成(chéng)為(wéi)其基因(yīn)組學實驗(yàn)室的(dí)標準(zhǔn)化工(gōng)具之一(yī)。